由于第一届“美在花城”还在尝试阶段，没来得及制作一支主题曲贯穿整个赛程，第二届比赛才有了自己的主题曲。这支名为《美丽瞬间》的主题曲，由音乐人毕晓世作曲，许军军作词，旋律优美，歌词朗朗上口，被观众喜爱。虽然此后毕晓世也为“美在花城”重新创作过一曲名为《今夜与美丽相约》的主题曲，但由于感情因素，如今提到“美在花城”主题曲，大多数人第一个想到的还是《美丽瞬间》。